創(chuàng)新研發(fā)
Innovative R & D
詳細信息
【獸藥名稱】
通用名：羊棘球蚴(包蟲)EG95蛋白ELISA抗體檢測試劑盒
商品名：無
英文名：ELISA Kit for Detection of Goat and Sheep Antibody against EG95 Protein of Echinococcus (Hydatid)
漢語拼音：Yang Jiqiuyou (Baochong) EG95 Danbai ELISA Kangti Jiance Shijihe
【主要成分與含量】
| (1) | 抗原包被板 | 96孔/板x2板/盒 |
| (2) | 陰性對照血清 | 50uL/管x1管/盒 |
| (3) | 陽性對照血清 | 50uL/管x1管/盒 |
| (4) | 酶標二抗 | 0.2mL/管x2管/盒 |
| (5) | 稀釋液 | 30mL/瓶x2瓶/盒 |
| (6) | 10x濃縮洗滌液 | 30mL/瓶x1瓶/盒 |
| (7) | TMB底物A液 | 10mL/瓶x1瓶/盒 |
| (8) | TMB底物B液 | 10mL/瓶x1瓶/盒 |
| (9) | 終止液 | 10mL/瓶x1瓶/盒 |
| (10) | 血清稀釋板 | 96孔/板x2板/盒 |
| (11) | 封板膜 | 2張/盒 |
| (12) | 說明書 | 1份/盒 |
【性狀】
試劑盒應密封完好、無破損、無裂痕、無滲漏。抗原包被板、陽性對照血清、陰性對照血清、酶標二抗、稀釋液、10x濃縮洗滌液、TMB底物A液、TMB底物B液、終止液等組分齊全。
【作用與用途】
用于檢測綿羊、山羊血清中細粒棘球蚴(包蟲)主要保護性抗原EG95蛋白的抗體。
【用法與判定】
1 用法
1.1 樣品制備 取動物全血，待血液凝固后，4000r/min離心10分鐘，收集上清備用；也可采集血液，待凝固后自然析出血清，吸出血清備用。要求血清清亮，無溶血。
1.2 洗滌液配制 10x濃縮洗滌液恢復至室溫后充分搖勻，用去離子水作10倍稀釋備用。
1.3 樣品與對照品稀釋 在血清稀釋板上，將待檢血清和陰、陽性對照血清按1：50倍的體積稀釋(推薦稀釋方法：98uL樣品稀釋液中加2uL血清樣品)。
1.4 操作步驟
1.4.1 加樣 取抗原包被板，每孔加入50u稀釋液，再取稀釋好的待檢血清和對照血清各50uL加入相應孔中，其中，陰性、陽性對照血清各2孔，輕輕振搖混勻孔中樣品(勿溢出)。
1.4.2 溫育 置37°C溫箱內30分鐘。
1.4.3 洗滌棄去反應液，每孔加入稀釋好的洗滌液200uL，室溫靜置浸泡1分鐘，用掉洗滌液，在吸水紙上拍干，重復3次：或者自動洗板機洗滌3次。
1.4.4 加酶標二抗 用稀釋液將酶標二抗進行1：100稀釋(現配現用)，每孔加入稀釋好的酶標二抗100uL。
1.4.5 溫育 置37°C溫箱內30分鐘。
1.4.6 洗滌 同1.4.3。
1.4.7 顯色 每孔加入100uL底物工作液(TMB底物A液與B液等體積混合好，現配現用)，室溫避光顯色反應10分鐘。
1.4.8 終止每孔加終止液50uL，10分鐘內測定結果
1.4.9 讀數 在酶標儀內讀取各孔450nm波長吸光度。
2 判定
2.1 試驗成立條件陽性對照孔OD：值均>1.20，陰性對照孔ODsom值均<0. 20。
2.2 結果判定 待檢血清孔OD值<0.30，判為棘球蚴(包蟲)EG95抗體陰性；待檢血清孔OD：som值≥0.30，判為棘球蚴(包蟲)EG95抗體陽性。
【注意事項】
(1)除酶標二抗外，各種試劑都應于使用前平衡至室溫后方可使用，有結晶析出的，務必37℃水浴加熱使其完全溶解；液體試劑用前混勻。為保證結果準確可靠，操作環(huán)境溫度應控制在20土5℃。
(2)微量移液器應進行定期校準，以避免誤差過大影響檢測結果。
(3)應確保血清樣本的質量，避免使用嚴重溶血樣品和脂狀樣品；避免清樣本反復凍融；血清樣本2~8℃儲存應不超過5天，長期保存應置-20℃以下：如血清樣本出現渾濁或絮狀物，應離心后取上清進行檢測。
(4)防止試劑和樣本的相互污染；試劑盒應在有效期內使用，避免不同批次的試劑盒混用。
(5)沒有用完的抗原包被板條應與干燥劑一同放回密封袋中，于2~8℃保存。
(6)溫育時，反應板不能看放，應平鋪在37℃溫箱中，以免導致各反應板受熱不均。
(7)TMB底物A液和B液不要暴露于強光，避免接觸氧化劑。
(8)終止液具有腐蝕作用，避免接觸眼睛和皮膚。
(9)嚴格按說明書操作，并控制好每一步的反應時間和溫度。
(10)本試劑盒不能區(qū)分細粒棘球蚴自然感染與疫苗免疫接種產生的抗體：本試劑盒檢測多頭蚴感染的羊血清時，出現7.69%(1/13)陽性率，因此，不排除其與羊多頭蚴抗體發(fā)生交叉反應的可能性。
【規(guī)格】192孔/盒
【貯藏與有效期】2~8℃保存，有效期為9個月。
【批準文號】獸藥生字230248948
【生產企業(yè)】重慶澳龍生物制品有限公司
【地 址】重慶市榮昌區(qū)板橋工業(yè)園區(qū)四支路五號
【郵 編】402460
【技術服務】023-46763511
【銷售熱線】023-46761801
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